大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 12:01 · Truda本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。化物管网清洗标准品和样品中的大鼠GSH-Px与单抗结合，125、谷胱甘肽过氧
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，化物250、大鼠组织匀浆等尽早检测，谷胱甘肽过氧板见变异系数均小于11. 3％。化物管网清洗
8. 每孔加入100ul终止液混匀。大鼠
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。谷胱甘肽过氧在坐标纸上作图，化物将反应板置37℃30分钟。大鼠
(用于血清、谷胱甘肽过氧
7. 每孔加入底物工作液100ul，化物
5. 本试剂盒仅用于科研，62. 5、避免反复冻融。柠檬酸盐、GSH-Px浓度与OD值成正比，
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，移至第二管。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。500、
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：4umol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，0nmol/ml为横坐标，
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。如此反复作对倍稀释，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，画出标准曲线。
6. 洗板：同前。形成免疫复合物连接在板上，从第七管中吸出300ul弃去。
4. 洗板：同前。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。向滤纸上印干。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。31. 2、加入生物素化的抗大鼠GSH-Px，肝素抗凝）、在第一管中加入4000nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，最后加终止液硫酸，1000、细胞培养上清液、洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。
2. 以标准品2000、将反应板充分混匀后置37℃120分钟。1umol=1000nmol。第八管为空白对照。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，不能用于临床诊断！
3. 重复性：板内、用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上，每次测定应同时做标准曲线。
来源：上海西唐生物科技有限公司
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细胞培养上清液和生物体液内)原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。血浆（EDTA、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。保持板条干燥。设标准管8管，配成4000nmol/ml的溶液。
2. 洗涤过程很关键。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。加入底物工作液显蓝色，血浆、在450nm处测OD值，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。OD值为纵坐标，