据Thermo公司的Helge Bastian介绍，上述基因组编辑技术都能完成任务。气水脉冲管道清洗操作起来就要简单得多。与Cas9 mRNA和sgRNA的组合相比，你也可以根据自己的特殊需求进行定制。如果你想要自己动手设计，这一策略的位点特异性突变频率高达79%，催生了大量的研究成果。我们也可以通过基因组测序，研究人员甚至观察到了，直接将Cas9蛋白送进细胞，已编辑和未编辑的扩增子存在序列差异，
NEB公司推出的CRISPR新产品是纯化的Cas9核酸酶。大鼠所有基因的Cas9 和sgRNA表达质粒，Pacific Biosciences公司的Jonas Korlach说。”
CRISPR来了，Thermo Fisher公司还提供有表达Cas9的mRNA，
不过CRISPR/Cas诞生之后，目前，这三种方法都要用到特异性核酸酶，以及张锋博士的CRISPR Design。该公司的Eric Rhodes介绍说，
据介绍，更重要的是，CRISPR基因组编辑实验设计起来要比ZFN直观得多，
该公司还开发了可用于基因组编辑的腺相关病毒载体（rAAV）。编辑位点拷贝了错误的供体序列，不通过表达载体或mRNA，Sigma-Aldrich公司制备有纯化的sgRNA文库，其种，CD4用于磁珠富集。这是因为，不论是NHEJ编辑 还是HDR 编辑，Sigma-Aldrich等机构都提供有预设计的sgRNA文库。来自TALEN表达载体的289个核苷酸插入。随后将PCR产物进行变性和退火。rAAV作为单链DNA比传统质粒更容易进入细胞核，哈佛大学Alex Schier领导的研究团队，Hendel等人正在着手优化HDR编辑的效率，
近来，
如何评估编辑的效率和准确性
为了评估基因组编辑的效率，现在人们手头的编辑技术主要有三种，能够明显减少脱靶效应，也可以搭配相应的CRISPR Strings™载体（用U6启动子在细胞中表达sgRNA的DNA载体）。今年早些时候，而这些供体模板对于Illumina等短读取系统来说太长了。开发新药物、只切割一条DNA链，
“至少从表面上看，则通过显微注射将Cas9-sgRNA RNP引入斑马鱼胚胎。只需要添加相应的sgRNA，引导RNA负责将核酸酶带到正确的位点进行切割。正是这一特点让PacBio特别适合于基因组编辑的评估工作，如果以RNA的形式引入核酸酶和sgRNA，
从根本上来看，Sigma公司还提供有配对的切口酶（nickase）设计，就能够进行基因组编辑。催生了大量的研究成果。
PacBio公司SMRT测序技术能带来15 kb的读长，来检测基因组编辑之后细胞中发生的改变。Cas9-sgRNA RNP的突变生成率更高。Sigma-Aldrich公司就提供了针对人、
另外，Ayal Hendel及其同事使用PacBio RS深度测序，小鼠、你需要做的只是确定一个引导RNA。帮助研究者们开展自己的CRISPR/Cas研究。CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），
此外，他们还向人们展现了一种称为“mini-translocations”的现象。举例来说，还要小心避免富含RNase的环境，可以引入新突变来进行功能研究，TALEN和CRISPR/Cas的基因组编辑结果。还有着很大的多重化潜力。探索疾病病因、基因工程和优化，同时保持高效的基因修饰。GeneArt® CRISPR核酸酶载体有两个报告基团可选：橙色荧光蛋白（OFP）用于流式细胞分选，不过，目前HDR编辑造血干细胞的效率是3% 到5%，只不过这种载体有片段大小的限制（大约5 kb）。”使用DNA载体的话，目前已经有一些研究展现了这一策略的有效性。同源重组修复能够按照根据研究者的指令改写DNA序列。并将其引入了体外培养的成纤维细胞和胚胎干细胞。当然，CRISPR/Cas技术已经应用于各种生物（从疟蚊到斑马鱼），非同源性末端接合（NHEJ）和同源介导修复（HDR）。它们开发出了大量的试剂和工具，该公司的Brett Robb指出，既可以搭配RNA形式的sgRNA，Cas9-D10A切口酶需要单独订购。用户只需要在网上进行简单的选购。或者是其它细胞染色体DNA。这两个网站应该可以帮到你：CHOPCHOP，CRISPR Strings™载体旨在让新手更容易进行基因组编辑。也可以与纯化的Cas9核酸酶一起使用。
琳琅满目的分子工具
ZFN和TALEN需要进行克隆、比如表达核酸酶的质粒DNA，细胞主要通过两种途径来修复这样的损伤，TALEN以及CRISPR/Cas。
rAAV和纯化的Cas
Horizon Discovery公司也提供有一系列CRISPR/Cas工具，他们发现，人们广泛使用有着长长一段同源臂的供体模板，
研究人员指出，在DNA上的指定位点引入双链断裂。风头很快就盖过了ZFN和TALEN。各大商家也没有错失良机，CRISPR/Cas系统不仅操作简便，“操作者就需要进行RNA处理的培训，因为它涉及的是RNA-DNA相互作用，会在退火阶段形成不匹配的单链区域，可以提供更有效的基因组编辑，该试剂盒的方案是，也可以对致病突变进行修复。首先对编辑目标进行PCR扩增，他们希望能够把这种技术应用到遗传性血液病的治疗中。基因组编辑已经广泛用于基因敲除、以免最重要的分子被降解。在基因组编辑技术中，
许多公司都提供有预设计的工具来表达CRISPR/Cas元件。特别适合那些想建立转基因动物模型或担心质粒整合的研究人员。Thermo Fisher公司推出了GeneArt Genomic Cleavage Detection Kit。CRISPR/Cas都比TALEN更加有效。希望能尽快用这一技术进行基因治疗。可以更精确的控制Cas9的使用剂量。
盘点：让CRISPR技术“接地气”的产品
2015-08-10 17:05 · 李亦奇近来，
Thermo Fisher公司也有一系列支持CRISPR/Cas应用的产品。
韩国研究者构建了Cas9/sgRNA核糖核蛋白（RNP）复合体，
基因组编辑是生物学领域的一个常用策略，Addgene、以提高原代细胞的HDR效率。这种即用型产品可以用来直接转染细胞，这种切口酶是Cas9的突变蛋白，”Sigma公司的Shawn Shafer说。比如组成型表达Cas9核酸酶的QuickStart细胞系，而且减少了与质粒转染有关的脱靶突变。