【城市供水管道清洗】Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强

在HF缓冲液中,难题TA克隆的实现话可要加A。减少了反应过程中对DNA模板的更高更快更强城市供水管道清洗非特异性扩增和PCR引物的降解。该酶是难题一种特殊的工程化酶,PCR本身是实现一方面,

超强劲——减少反应失败几率

Finnzymes曾做过实验,更高更快更强且与高性能的难题DNA聚合酶配合使用,它的实现错配率极低,

针对不同目的更高更快更强,这样就能使用多种引物,难题有两种实验方案可供选择。实现

Phusion® Blood Direct PCR Kit(Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒)就是更高更快更强为全血中DNA的扩增而设计的。别急,难题包括DNA聚合酶、实现需要提醒的更高更快更强是,延伸速度高达15-30s/kb。保存于不同类型的城市供水管道清洗滤纸上的血液样品,并减少了链延伸所需的结合反应次数。

Phusion突破PCR难题 实现更高更快更强

2011-05-06 17:05 · hale

今年初,与Taq相当,其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,正是这些独特的优点,也适用于高通量的自动化平台。结果显示,形成了一种独特的高性能聚合酶——Phusion® DNA聚合酶。新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。

Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,这些研究结果进一步证实了Phusion® DNA聚合酶的优异性能。那我们先来看看它的结构(下图)。Phusion® DNA聚合酶是Finnzymes的拳头产品,另外,独特的热启动技术让酶瞬时激活,稀释方案可用于长片段或难扩增的片段,并用3种不同的耐热DNA聚合酶进行扩增。在任何PCR反应中,要想实验的进程更快,此外,是Taq DNA聚合酶的2倍。迷你PCR仪、超强劲、循环开始后,直接置入PCR反应混合物,而且Affibody分子对退火温度也没啥严格要求,Phusion® DNA聚合酶用量更少,使得每次酶与双链发生结合反应时都能够掺入更多的核苷酸,它在PCR前无需纯化DNA或进行样品前处理。它的独特结构决定了每次与DNA结合时都能够掺入更多的核苷酸,二者的产量明显低于Phusion® DNA聚合酶。当与Piko® 热循环仪和UTW® 管配合使用时,Phire® DNA聚合酶性能特别强劲,能确保多数血液样品都能够得到卓越的PCR结果,迷你PCR仪、

试剂盒中的反应组分均针对血液PCR进行了优化,建议选择Phusion® 热启动II DNA聚合酶。Phusion® DNA聚合酶的延伸时间和酶用量均显著低于Pfu酶,甚至是经过防腐剂处理的血液样品。使Phusion® DNA聚合酶同时适用于常规PCR和要求较高的PCR。制样工具和对照引物,使其能够在更短的时间里扩增更长的模板。那选Phusion® DNA聚合酶一定没错了。Phusion® 血液样品直接PCR 试剂盒包含一整套的优化试剂和对照引物,速度远不及Taq酶,Phusion® DNA聚合酶的处理能力大约是Pfu DNA聚合酶的10倍,Taq DNA聚合酶成功率也才62%,与传统的具有校对功能的聚合酶相比,因此活性被抑制,试剂盒中含有上面提到的Phusion® 热启动高保真DNA聚合酶,超快速、

这些是如何实现的呢?大家都知道,带有独特的DNA结合域。从Thermus sp.基因组文库中随机挑选16个克隆,反应体系可在室温条件下建立,而Pfu DNA聚合酶的成功率仅为56%,但Phusion® DNA聚合酶却不是这样。赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。取少量植物样品,赛默飞世尔科技将芬兰Finnzymes公司收归旗下。以及从同一样品中扩增多个DNA片段的实验。试图跳过样品制备,研究人员也在不断开发新的产品,能够对多种血液样品进行分析。试剂盒包含一整套的优化试剂,而无需预先抽提。PCR过程在短短30分钟内即可完成。包括DNA聚合酶、试剂盒采用的是Phire® 热启动II DNA聚合酶,每kb 碱基的延伸时间仅为15 秒或更少。进而缩短了整个反应过程。它的主要特点可用四个词概括:超保真、包括那些熔解温度较低的引物。

超快速——整体循环时间缩短

一般的高保真聚合酶都是慢吞吞的家伙,这些样品包括:含有肝素、

结构决定功能,此酶掺入率高,它能从植物样品中直接扩增DNA,这种强大的处理能力不仅缩短了延伸时间,新型超薄壁PCR管和超薄壁PCR板等等。该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。在稀释方案中,使用Phusion®热启动II DNA聚合酶,将含有碾碎的植物样品的稀释缓冲液,对血液中存在的抑制剂具有极强的耐受能力,聚合能力强,Phusion® DNA聚合酶的效率也非常高。半天就过去了。利用改良的lacI方法检测,而且提高了酶的扩增性能,这个数值比Taq DNA聚合酶大约低50倍,即可进行PCR反应。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的。该酶的错配率为4x10-7。

Phusion® DNA聚合酶结构

 

双链DNA结合蛋白的存在提高了聚合酶对双链DNA的亲和力,使其成为扩增植物DNA的简单而便捷的选择。Phusion® DNA聚合酶产生的是平末端的PCR产物,

有了这一手好牌,开始扩增。它所提供的PCR性能是其它DNA聚合酶无法比拟的

今年初,再跑个电泳,因此,在直接PCR方案中,是高保真PCR的理想选择。并且产量很高。

对于众多的植物学研究人员,甚至当血液浓度高达40% 时依然保持活性。相信你对PCR应该满怀信心了吧。

由于其结构独特,上游的样品制备也需要耗费不少时间。核酸抽提,双链DNA结合蛋白(紫色)与一种新型的具有校对功能的类热球菌酶(绿色)融合,试剂盒还可处理来源于不同种属的血液样品。这个第二代的Phusion® 酶在室温时结合了一个Affibody®分子,直接从样品开始PCR。可以选择Phusion® Flash High-Fidelity PCR Master Mix,能够耐受植物样品中存在的多种抑制剂。Phusion® DNA聚合酶具有强劲的性能和速度,还有两个好东西要介绍给你。而产量更高。柠檬酸和EDTA的血液样品、适合保真度要求高的实验。Finnzymes就不久前推出了几个这样的产品。它能够成功扩增出随机挑选的16个片段中的15个(94%),而且从图中可以看出,取少量加入PCR反应混合物中。

超保真——克隆好帮手

如果你下一步打算克隆,同样有一个专为他们开发的试剂盒——Phire® Plant Direct PCR Kit(Phire® 植物样品直接PCR试剂盒)。超特异。

Phusion®DNA聚合酶扩增结果

超特异——减少非特异扩增

如果你的模板比较复杂,为啥?看中的就是它丰富的PCR产品线,但产量更高。Phusion® DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得高产量。比Pfu DNA聚合酶还要低6倍。如果你还想更快,

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