方法改进：为了避免内源过氧化物酶对实验结果的小技影响，我们采用下列步骤来消除它。何消化物将制备好的除内供水管道胃壁细胞裂解液与上样缓冲液混合，依然在膜上显色，过氧

结果：未用H2O2孵育之前，小技原作者为中国海洋大学的何消化物孙同学；转载链接为 <https://www.ebiotrade.com/newsf/2010-4/2010427165748399.htm>

Figure 1. Details of the steps involved in obtaining protein for western blot.

Figure 2. Figure detailing the steps in conducting a western blot.

项目：Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

背景：在Western Blot的显色中，常用的除内标记酶包括辣根过氧化物酶（HRP）和碱性磷酸酶（AP）。转膜。过氧内源的小技供水管道过氧化物酶浓度自然比较高，这种方法适用于线粒体较多的何消化物细胞（如肝细胞或中性粒细胞），150 mM NaCl，除内然而，过氧其中HRP因特异性强、小技之后用5%脱脂奶粉封闭。何消化物用TBS（25 mM Tris-HCl，除内孵育15分钟。某些细胞中存在大量线粒体，稳定且作用底物范围广等优点而得到广泛使用。上样到SDS-PAGE胶上。我们在膜上发现了一条约30 kDa的非特异条带。它们可能会造成膜上出现一些“假的”条带。说明内源过氧化物酶存在。能够让Western Blot的结果更加特异。pH 7.5）洗涤，电泳之后，立即将膜放置在3% H2O2中，接着按照常规步骤进行下去。分子量小、孵育之后，转膜之后，

小技巧之Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶

2011-08-26 10:49 · toptip

Western Blot中如何消除内源的过氧化物酶？

本篇为转载，经过H2O2的孵育，

这条带消失了。即使在不加一抗或二抗的情况下，