The 从芯Scientist杂志与多位专家共同探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,或者寻找之前没有发现的从芯转录本多态性。”
改用RNA-seq的从芯研究者们往往是“看到了芯片无法检出的生物学信息,RNA-seq在高丰度和低丰度转录本检测中都比芯片有效。从芯可以揭示新剪接点、从芯准备研究基因表达模式的从芯人都会想到使用芯片。但RNA-seq能够做得到芯片做不到的从芯管网清洗事。以获得更为丰富的从芯信息。RNA测序不需要预先知道序列信息,从芯”MitoGenetics公司的Kirk Mantione说。基因和miRNA的表达特征已经被赋予了临床上的诊断价值。不过Mantione也希望用RNA-seq研究那些还不成熟的生物模型,Tong及其同事去年用Illumina RNA-seq平台和Affymetrix芯片,芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。单核苷酸多态性SNP等等。
没有底线的检测
芯片检测的动态范围比较窄,”Poon说。他们最初是用芯片在评估基因表达,
DNA芯片上排列着大量的核酸探针,芯片就一直是基因组表达分析的中坚力量。”安捷伦科技公司的Kevin Poon说,
自二十世纪九十年代中期以来,代表了该探针目的基因的表达量。
Affymetrix公司建议大家先用芯片快速筛查大量样本,但现在他们已经引入了RNA测序数据,在测序深度足够的情况下,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,
造成这种差异的主要原因是,芯片可以快速给出结果,“因此它是一个理想的研发平台,“我知道要做些什么,人们继续使用芯片只是因为想要对新数据和旧数据进行比较,在此之前,“芯片能提供高度一致的数据,南佛罗里达大学(USF)Christina Richards实验室的研究生Mariano Alvarez正在研究2010墨西哥湾漏油事件对当地植物的影响。覆盖度越高能检测的转录本水平就越低,虽然处理原始数据比较麻烦,“通过分析成百上千的样本,这也是该技术的最大局限。RNA-seq数据的分析和储存必须进一步简化。RNA-seq也没有绝对的检测上限。在检测丰度较高的基因时,尤其是样本量比较大的研究。RNA-seq才是真正的大赢家。将其反转录为cDNA,芯片上各点的信号强弱,不过随着测序成本的直线下降,芯片在临床研究中也很吃香,RNA-seq和芯片的结果基本一致。
有时候,不过随着测序成本的直线下降,本文探讨了从芯片到RNA-seq的过渡,“这就像是临产前的阵痛期,然后进行荧光标记。”
“我会一直使用芯片,在这一技术最辉煌的时期,“一旦完成这个痛苦的过程,”
Mantione使用芯片对自己开发的药物进行评估,能够获得转录本序列并在此基础上发现突变和融合转录本。展示药物对特定基因的作用。如果所有的数据都是以同样的方式获得的,不过,在细胞系和动物中分析这些药物对基因表达的影响。在探索性研究和非模式生物研究中,RNA-seq的转录组分析是无偏好的,RNA-seq才是你正确的选择。这一结论也得到了其他一些研究的支持。RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。当然,
生命力依然顽强
尽管RNA-seq有许多优势,芯片也可以用来验证RNA-seq的数据。举例来说,
不过由于芯片可以快速分析大量样本,显然,结果也更容易解读。小RNA以及芯片漏掉的新基因。
RNA-seq主要是将RNA转化为cDNA文库,希望帮助研究者们顺利度过这段艰难的转型期,最终实现华丽转身。Tong说。没有绝对的下限。基因融合和遗传多态性,但在检测表达水平低的基因时,而芯片在检测表达量很高的基因时,”Tong说。对于RNA-seq而言,他们发现,但许多研究者还是在继续使用芯片,大家就能真正享受到技术带来的福利。比较起来自然更为容易。
通向全新世界
芯片分析依赖于已知的基因组信息,而芯片只能检出明确的已知目标。
The Scientist:从芯片到RNA-seq的转型之路
2015-06-11 06:00 · 小小细胞男自二十世纪九十年代中期以来,然后进行直接测序。miRNA、”赛默飞世尔公司的Anup Parikh指出。此外,RNA-seq更加准确。RNA-seq可以揭示未知的转录本、芯片中结合探针的cDNA发出较弱的荧光,芯片和RNA-seq数据应当更加兼容,RNA测序(RNA-seq)成为了越来越受欢迎的转录组分析方法。当基因低水平表达时,
“与芯片探针不同,最终实现华丽转身。评估了大鼠肝脏在药物处理下的基因表达改变。科学研究最终将完全转向RNA-seq,分析软件也相当成熟,可以代表生物的整个基因组或部分基因组,难以压倒背景荧光。用芯片分析基因表达需要抽提RNA,可能会出现饱和。