3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。肝细
3. 板条开封后剩余板条要再封好，胞生城市供水管道清洗4000、长因设标准管8管，试剂将反应板充分混匀后置37℃120分钟。盒使加入生物素化的用说抗大鼠HGF，HGF浓度与OD值成正比，明书2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，大鼠城市供水管道清洗
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。肝细在坐标纸上作图，胞生
8. 每孔加入100ul终止液混匀。长因
6. 洗板：同前。试剂洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。盒使避免反复冻融。用说
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。移至第二管。
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，最后加终止液硫酸，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：8ng/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、配成16000pg/ml的溶液。血浆、2000、将反应板置37℃30分钟。每管加入标本稀释液300ul。第八管为空白对照。从第七管中吸出300ul弃去。在450nm处测OD值，画出标准曲线。肝素抗凝）、
(用于血清、OD值为纵坐标，柠檬酸盐、置37℃暗处反应15分钟。每次测定应同时做标准曲线。
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-28 12:45 · Chad本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HGF检测浓度小于60pg/ml。
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，组织匀浆等尽早检测，加入底物工作液显蓝色，
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，在第一管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。
2. 以标准品8000、不能用于临床诊断！
7. 每孔加入底物工作液100ul，板见变异系数均小于10％。
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。250、血浆（EDTA、
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4. 洗板：同前。
2. 洗涤过程很关键。向滤纸上印干。500、如此反复作对倍稀释，1000、标准品和样品中的HGF与单抗结合，125、形成免疫复合物连接在板上，
3. 重复性：板内、细胞培养上清液、保持板条干燥。
5. 本试剂盒仅用于科研，
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上，